通过均质裂解大肠杆菌

细菌裂解液被广泛用在生命科学行业中,从口服疫苗到免疫调节剂,在生物技术和制药领域的研究、开发和分析中提供各种应用。可使用不同的方法从大肠杆菌细胞中制备细胞裂解液,例如:超声处理、均质、酶裂解和冷冻/研磨。

均质机是对大量细菌进行裂解的最常用的设备。先在高压下细胞悬浮液被泵送通过均质阀的微隙,然后对悬浮液施加的压力突然释放,这会导致细胞立即膨胀,形成湍流和液体剪切力,同时在高压作用下使细胞破裂。

在这个过程中,主要的破坏性因素是施加给样品的压力和通过均质阀后的的压降作用产生。这就产生了撞击力和剪切应力,使细胞根据操作压力按比例破裂。

与其他方法相比,均质化既方便又高效,它能提供更高百分比的细胞破坏率。现代化的 GEA 均质机能连续工作,能在较高的运行压力下处理大量细胞,这就无需向细胞悬浮液中添加脱氧核糖核酸 (DNase)。

对于单级均质机,典型应用的建议压力是 600–1000 巴;通常需要多次循环(2–3 次)才能实现充分的裂解。应注意,较高的处理压力会导致运行温度升高。因此,应在使用之前将细胞冷却到 4 °C,以避免因发泡使蛋白质失去活性。

GEA 还提供用于温和地处理脆弱的细胞培养菌的发酵器、分离机、倾析器和错流过滤技术。我们明白,无菌、效率以及对活体微生物有机体的谨慎处理是进行经济、可靠、高效处理的前提条件。